In soluzioni acquose di Solfuri esiste un equilibrio pH-dipendente tra Solfuro d’Idrogeno (H2S) disciolto, ioni Idrogeno Solforato (HS-) e ioni Solfuro (S2-) Nella zona acida, in cui praticamente è presente solo Solfuro d’Idrogeno disciolto, questo reagisce con Dimetil-p-fenilendiamina e ioni Ferro(III) formando il Blu di Metilene. Questo colorante viene determinato spettrofotometricamente alla lunghezza d’onda di 745 nm.